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化學(xué)發(fā)光試劑盒的保存
1. 保存條件:
1.1 試劑盒應(yīng)放置于2~8℃冰箱中存放。
1.2 試劑盒在取用過程中禁止顛倒,以避免試劑被污染。
1.3 有特殊要求的試劑應(yīng)嚴(yán)格按照操作說明書要求的保存條件保存。
2. 保存時(shí)間:
2.1 未開封試劑盒于2~8℃保存時(shí),可在有效期之內(nèi)正常使用。
2.2 已開封試劑盒每次使用后需及時(shí)放回2~8℃冰箱內(nèi)保存,應(yīng)盡可能在開封后1個(gè)月內(nèi)使用。(按說明指示的開封的半成品有效期計(jì)算,盡量在半成品zui短的有效期內(nèi)用完)
化學(xué)發(fā)光試劑的準(zhǔn)備
1、實(shí)驗(yàn)前,先將實(shí)驗(yàn)中所需的所有試劑及待測樣品從冰箱中取出,待溫度與室溫(25℃)平衡1小時(shí)以上后使用。加樣前應(yīng)將所用試劑和待測樣本分別充分混勻。
2、酶結(jié)合物和抗體混勻時(shí),切忌產(chǎn)生大量氣泡。
3、實(shí)驗(yàn)中用于凍干品復(fù)溶和稀釋濃縮洗滌液所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。
4、凍干品加入蒸餾水或去離子水后,應(yīng)蓋上膠塞后靜置,待固體物質(zhì)完全溶解后,再將試劑瓶反扣在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,讓附著在瓶蓋上的固體物質(zhì)溶解,然后充分混勻后待用。
酶促化學(xué)發(fā)光測定的主要問題
1、 酶促化學(xué)發(fā)光一步法的“ HOOK EFFECT” 問題
2、 酶促化學(xué)發(fā)光測定出現(xiàn)假陽性的原因
2.1操作及儀器因素:加樣、洗板、自動(dòng)化加樣系統(tǒng)的標(biāo)本間“交叉污染”;
2.2標(biāo)本因素: RF、補(bǔ)體、異嗜性抗體、動(dòng)物抗原、動(dòng)物抗體、高濃度Ig、溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過長、標(biāo)本凝固不全。
3、酶促化學(xué)發(fā)光測定出現(xiàn)假陽性的原因
3.1操作、試劑及儀器因素:標(biāo)本未加、試劑過期或變質(zhì)、儀器針孔堵塞、標(biāo)本“交叉污染”;
3.2標(biāo)本因素:補(bǔ)體、自身抗體、反復(fù)凍融
4、 綜上所述,盡管化學(xué)發(fā)光免疫分析的操作步驟非常簡單,但有可能會(huì)影響測定結(jié)果的因素卻較多,分布在測定操作的各步之中,尤以加樣、溫育和洗板為甚。